微生物，如大腸桿菌和釀酒酵母，廣泛應用于工業微生物生產，利用代謝工程以及合成生物學的方法能夠在基因組水平高效地實現對多種微生物的代謝工程改造，為人工設計構建高效的細胞工廠和新型的生物催化劑，為實現重要化合物的生物合成提供技術平臺，提升微生物在醫藥、農業、工業等多個領域中的應用價值。

天博克羅地亞官網是一家專業的微生物基因編輯公司，可根據客戶的具體需求提供一對一的方案定制服務。可進行編輯的細菌、真菌種類覆蓋當前熱門研究領域，敲除、敲入、點突變均可實現。

一、微生物基因編輯技術原理

1. CRISPR/Cas9基因編輯系統：創新性結合CRISPR/Cas9系統和Red/ET重組系統，利用CRISPR/Cas9系統的高效定點切割優勢，以及Red/ET高效重組優勢，極大提高了細菌和真菌的基因編輯的效率。而且還能實現無痕編輯，大大提高后續實驗可靠性。

2. 位點特異性基因重組系統：Cre-lox 系統來源于大腸桿菌P1 噬菌體，可以促使噬菌體DNA插入到細菌基因組中。Cre 重組酶可以識別長度為34 bp 具有方向性的loxP位點。同一DNA分子上同向的兩個loxP 位點發生重組，可以刪除兩個loxP 位點之間的DNA片段；同一DNA 分子上反向的兩個loxP 位點發生重組，可以使兩個loxP 位點之間的DNA片段發生倒置。在細菌基因編輯中，Cre-lox 重組系統常用作刪除選擇標記基因、大片段基因的刪除和倒置等。

3. 同源重組系統：在細菌中引入兩端具有與受體基因組DNA同源片段的外源dsDNA 分子，借助于λ-Red 重組系統或RecE/T 重組系統，誘發同源片段中間的外源DNA 序列與基因組序列發生交換，可實現基于同源重組的基因編輯。

二、微生物基因編輯定制服務

三、基因編輯微生物技術流程

1. 根據客戶需求、細菌/真菌類型和靶基因的情況進行基因編輯方案設計

2. 構建編輯載體

3. 制備感受態以及電轉

4. 抗性篩選獲得陽性克隆菌株

5. 對編輯后的菌落進行PCR鑒定和靶位點測序鑒定

四、微生物基因編輯技術核心

1. 無痕基因敲除：利用Red/ET重組系統和CRISPR/Cas9基因編輯系統結合，實現高效定點切割，并消除外源質粒。

2. 無痕基因點突變：利用CRISPR/Cas9系統的高效定點切割優勢，實現基因組定點突變。

3. 無痕基因敲入：利用Red/ET重組系統和CRISPR/Cas9基因編輯系統結合，實現基因組定點敲入。

五、微生物基因編輯技術優勢

1. 高效定點切割：利用CRISPR/Cas9系統的高效定點切割優勢，極大提高了細菌基因編輯的效率。

2. 無痕編輯：可實現無痕敲除（不殘留抗性或重組位點），同時消除外源質粒。

3. 操作簡單：通過電轉的方法將CRISPR載體導入細菌體內進行基因編輯，可實現敲除、點突變和敲入等操作。

4. 靶向性強：CRISPR技術具有靶向性強、脫靶率低等優勢，可實現對特定基因的精準編輯。

5. 適用范圍廣：可實現多種微生物的編輯服務，包括細菌、真菌等。